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細(xì)胞培養的being之旅(lǚ)

2023-07-03  |  文章來源:  |  點擊率:

細(xì)胞是生物學領域研究的重(chóng)要材料,而細胞(bāo)培養是指在體外提供穩定(dìng)的培養環境使(shǐ)細胞健康生(shēng)長、穩定繁殖的方法。

細胞的培養流程並不複雜,但有人形容說,細胞培養需要像關心孩子一樣,否則稍不留神就“鬧點(diǎn)脾氣”:細胞汙染、活力不佳,或漸漸就不是原來的樣子(zǐ)。

我們要講(jiǎng)是(shì),細胞培養的being之旅(lǚ)。

準備(bèi)工作

無菌操作是細胞培養成功的關鍵因(yīn)素,所以須穿(chuān)上隔離(lí)服或專用的白大衣,戴上一次性(xìng)手套和口罩,換上專用一次性拖鞋。細胞培養操作前進行台麵、器皿消毒,務必用75%的酒精擦拭(shì)生物安全櫃(beingBBC-A2係列)的操作台(tái)麵,然後將櫃內紫(zǐ)外燈打開照射30分鍾左右進行滅菌,再開始培養操作(zuò)。


細胞複蘇

細胞複蘇遵守“慢凍快融”的(de)原則,細胞凍存管從液氮(beingBYDS係列)或超低溫冰(bīng)箱(beingBDW-86L係列)中(zhōng)取出後(hòu),通過(guò)PE手套,迅速放入37℃水浴(beingBW係列)中輕輕搖動融化約1min。離(lí)心處理後加(jiā)入培養基接種至培養瓶/培(péi)養皿(mǐn)中。

細胞培養

將含有細胞的培養瓶/培養皿放(fàng)入CO2培養箱(beingBIO-RHPBIO-RHP Pro係列)中,將參(cān)數調節到適當的溫度(37℃),適當的氣體濃度(dù)(CO2氣體(tǐ)濃(nóng)度5%),在培養箱底部或放置的水盤中加入超純水保證箱體內相對應的濕度,開始細胞培養,培養(yǎng)過程(chéng)中要定時觀察細胞培養情況。


通常情況下(xià),細胞(bāo)培養過(guò)程中發(fā)生汙染後(hòu),需將汙染的細胞丟棄,並(bìng)對(duì)CO2培養箱進行消毒滅菌,防止汙染源(yuán)進一步擴散造成更大的汙染。

所以保證(zhèng)培養環境(jìng)的穩定,是細(xì)胞培養成功的(de)重要因素。

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